Жаңы Coronavirus (SARS-Cov-2) Нуклеиндик кислотаны аныктоочу комплект
New Coronavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Fluрудаscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Product name 】Жаңы Coronavirus(SARS-Cov-2) Нуклеиндик кислотаны аныктоочу комплект (Fluorescent RT-PCR Probe Method)
【Packaging specэгерде менcations 】25 Тесттер/Комплект
【Intended usжашы】
Бул комплект жаңы коронавирустун нуклеиндик кислотасын мурун-жуткундун тампондорунда, орофарингеалдык (тамак) тампондорунда, мурундун алдыңкы тампондорунда, орто турбиналык тампондордо, мурун жуугучтарында жана мурундун аспираттарында алардын медициналык тейлөөчүсү тарабынан COVID19га шектелген адамдардан сапаттуу аныктоо үчүн колдонулат. Жаңы коронавирустун ORF1ab жана N гендерин аныктоо жаңы коронавирустук инфекциянын кошумча диагностикасы жана эпидемиологиялык мониторинги үчүн колдонулушу мүмкүн.
【Principles of the pросdure 】
Бул комплект белгилүү TaqMan зонддору жана жаңы коронавирус (SARS-Cov-2) ORF1ab жана N ген ырааттуулугу үчүн иштелип чыккан атайын праймерлер үчүн иштелип чыккан. ПТР реакциясынын эритмесинде буталарды спецификалык аныктоо үчүн спецификалык праймерлердин жана флуоресценттүү зонддордун 3 комплекти камтылган, ал эми спецификалык праймерлердин жана флуоресценттүү зонддордун кошумча топтому эндогендик чарбалык гендерди аныктоо үчүн комплекттин ички стандарттык контролу катары колдонулат.
Сыноо принциби - бул спецификалык флуоресценттик зонд ПТР реакциясындагы Taq ферментинин экзонуклеаздык активдүүлүгү менен сиңирилип, бузулат, ошентип кабарчы флуоресценттик топ менен өчүрүлгөн флуоресценттик топ бөлүнүп, флуоресценттик мониторинг системасы флуоресцентти ала алат. сигнал, андан кийин ПЦР күчөтүүнүн байытуу эффектиси аркылуу зонддун флуоресценттик сигналы белгиленген чектик мааниге - Ct маанисине жетет (Цикл босогосу). Максаттуу ампликон жок болгон учурда, зонддун кабарчылар тобу өчүрүүчү топко жакын болот. Бул учурда флуоресценттик резонанстык энергиянын трансфери пайда болуп, кабарчылар тобунун флуоресценциясы өчүрүү тобу тарабынан өчүрүлөт, андыктан флуоресценттик сигнал флуоресценттик ПТР аспабы менен аныкталбайт.
Сыноо учурунда реагенттерди колдонууну көзөмөлдөө үчүн комплект оң жана терс контролдоо каражаттары менен жабдылган: оң контролдо максаттуу участоктун рекомбинантты плазмиди, ал эми терс контролдоо айлана-чөйрөнүн булганышын көзөмөлдөө үчүн колдонулган дистилденген суу болуп саналат. Сыноодо оң жана терс контролду бир эле учурда коюу сунушталат.
【Main components 】
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | Componэнтс | |
| Намe | Specфикациялоо | Quantity | Quantity | |
| Позитивдүү башкаруу | 180 мкл/флакон | 1 | 1 | Жасалма жол менен курулган плазмидалар, дистилденген суу |
| Терс көзөмөл | 180 мкл/флакон | 1 | 1 | Дистилденген суу |
| SARS-Cov-2 Mix | 358,5 мкл/флакон | 1 | / | Өзгөчө праймер жуптары, спецификалык аныктоочу флуоресценттик зонддор, dNTPs, , MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Дистилденген суу ж. |
| Enzyme Mix | 16,5 мкл/флакон | 1 | / | Так ферменттери, тескери транскриптаза, UNG ферменттери ж. |
| SARS-Cov-2 Микс(лиофилизацияланган) | 25 тест/флакон | / | 1 | Өзгөчө праймер жуптары, спецификалык аныктоочу флуоресценттик зонддор, dNTPs, Taq ферменттери, тескери транскриптаза, дистилденген суу ж. |
| 2x буфер | 375 мкл/флакон | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, дистилденген суу ж.б. |
Эскертүү:(1) Ар кандай топтомдордогу компоненттерди аралаштырууга же алмаштырууга болбойт.
(2) Өзүңүздүн реагентиңизди даярдаңыз: Нуклеин кислотасын алуу комплекти.
【Storage conditions жана expiration date 】
For BST-SARS-25:Узак убакытка -20±5℃ ташуу жана сактоо.
For BST-SARS-DR-25:Бөлмө температурасында ташуу. -20±5℃ температурада узак убакытка сактаңыз.
Кайталануучу тоңдуруу-эрүү циклдарынан алыс болуңуз. Жарактуулук мөөнөтү болжолдуу түрдө 12 айга белгиленген.
Өндүрүлгөн жана колдонулган датасы үчүн этикеткасын караңыз.
Биринчи ачылгандан кийин реагент -20±5°С температурада 1 айдан ашык эмес же реагенттин мөөнөтү аяктаганга чейин сакталышы мүмкүн, кайсы дата биринчи келгенине карабастан, кайталанма тоңуу-эрүү циклдерин жана реагенттин тоңдуруу санын - эрүү циклдери 6 эседен ашпоого тийиш.
【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480.
【Sample requirements 】
1.Applicable үлгү түрү: Чыгарылган нуклеин кислотасы чечим.
2.Sample сактоо жана ташуу: Store at-20±5℃ 6 months.Freeze жана үлгүлөрдү эритүү үчүн 6 жолудан ашык эмес.
【Testing method】
1.Nucleic acid extraction
Вирустук нуклеин кислотасын экстракциялоо үчүн ылайыктуу нуклеин кислотасын алуу комплектин тандап, комплекттин тиешелүү нускамаларын аткарыңыз. Yixin Bio-Tech (Гуанчжоу) Co., Ltd. тарабынан чыгарылган нуклеин кислотасын экстракциялоо жана тазалоо комплекти же ага барабар нуклеин кислотасын тазалоочу комплект колдонуу сунушталат.
2. Reaction reagent preparation
2.1 For BST-SARS-25:
(1) SARS-Cov-2 аралашмасын жана фермент аралашмасын алып салыңыз, бөлмө температурасында толугу менен Vortex аппараты менен жакшылап эритип, андан соң кыска убакытка центрифугалаңыз.
(2) 16,5 uL Enzyme Mix 358,5 uL SARS-Cov-2 Mix кошулду жана аралаш реакция эритмесин алуу үчүн кылдат аралаштырылды.
(3) таза 0,2 мл ПТР сегиздик түтүгүн даярдаңыз жана аны ар бир скважинага 15 uL жогорудагы аралаш реакция эритмеси менен белгилеңиз.
(4) 15 мкл тазаланган нуклеин кислотасынын эритмесин, оң контролду жана терс контролду кошуп, сегиздик түтүктүн капкагын кылдаттык менен жаап коюңуз.
(5) Тескерисинче жакшылап аралаштырыңыз жана суюктукту түтүктүн түбүнө топтоо үчүн тез центрифугалаңыз.
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
( 1) Реакция аралашмасын даярдоо үчүн SARS-Cov-2 Миксине ((Лиофилизденген) 375ул 2х Буферди кошуңуз. Питтовкалоо жолу менен жакшылап аралаштырыңыз, андан соң кыска убакытка центрифугалаңыз. （Реакция аралашмасы даярдалгандан кийин, -20℃ температурада сактоо сунушталат. узак мөөнөттүү сактоо.)
(2) Таза 0,2 мл ПТР сегиздик түтүкчөсүн даярдаңыз жана аны ар бир скважинага 15 мкл реакция аралашмасы менен белгилеңиз.
(3) 15 мкл тазаланган нуклеин кислотасынын эритмесин, оң контролду жана терс контролду кошуп, сегиздик түтүктүн капкагын кылдаттык менен жаап коюңуз.
(4) Тескерисинче жакшылап аралаштырыңыз жана суюктукту түтүктүн түбүнө топтоо үчүн тез центрифугалаңыз.
3. ПЦР amplification （Иштөө орнотуулары үчүн инструменттин нускамасынан караңыз.）
3. 1 ПТР 8-түтүкчөсүн флуоресценттик ПТР аспабынын үлгү камерасына салыңыз жана жүктөө тартибине ылайык текшериле турган үлгүнү, оң контролду жана терс контролду орнотуңуз.
3.2 Флуоресценцияны аныктоо каналы:
(1) ORF1ab гени FAM аныктоо каналын тандайт (Репортер: FAM, Quencher: Жок).
(2) N ген VIC аныктоо каналын тандайт (Репортер: VIC, Quencher: Жок).
(3) Ички стандарт ген CY5 аныктоо каналын тандайт (Репортер: CY5, Quencher: Жок).
(4) Пассивдүү шилтеме ROX деп коюлган.
3.3 ПТР программасынын параметрин орнотуу:
| Кадам | Температура (℃) | Убакыт | Циклдердин саны | |
| 1 | Тескери транскрипция реакциясы | 50 | 15 мин | 1 |
| 2 | Taq ферментинин активдешүүсү | 95 | 2,5 мин | 1 |
| 3 | Taq ферментинин активдешүүсү | 93 | 10 с | 43 |
| Annealing узартуу жана fluorescence алуу | 55 | 30 с | ||
Орнотуудан кийин файлды сактап, реакция программасын иштетиңиз..
4.Results analysis
Программа аяктагандан кийин натыйжалар автоматтык түрдө сакталып, күчөтүү ийри сызыгы талданат. Күчөтүү ийри сызыгы аспаптын демейки босогосуна коюлган.
【Explanation of test results 】
1. Эксперименттин негиздүүлүгүн аныктаңыз: оң башкаруу FAM, VIC каналы типтүү күчөтүү ийри сызыгына ээ болушу керек, ал эми Ct мааниси жалпысынан 34төн аз, бирок ар кандай аспаптардын ар кандай босого орнотууларынан улам өзгөрүп турушу мүмкүн. терс башкаруу FAM, VIC канал эмес күчөтүлгөн Ct болушу керек. Жогорудагы талаптар бир эле учурда аткарылууга тийиш деп макулдашылды, антпесе бул тест жараксыз болуп саналат.
2. Жыйынтык чечим
| FAM/VIC каналы | Соттун жыйынтыгы |
| Ct＜37 | Үлгү тест оң |
| 37≤Ct＜40 | Күчөтүү ийри сызыгы S формасында жана шектүү үлгүлөрдү кайра карап чыгуу керек; кайра экспертизанын жыйынтыгы ырааттуу болсо, ал оң деп бааланат, болбосо терс |
| Ct≥40 Же Күчөтүү жок | Үлгү тести терс (же комплектти аныктоонун төмөнкү чегинен төмөн) |
Эскертүү: (1) Эгерде FAM каналы жана VIC каналы бир эле учурда оң болсо, SARS-Cov-2 оң деп аныкталат.
(2) Эгерде FAM каналы же VIC каналы оң болсо жана башка канал терс болсо, тестти кайталоо керек. Эгерде ал бир эле учурда оң болсо, SARS-Cov-2 оң деп бааланат, антпесе SARS-Cov-2 терс деп бааланат.
Тектеш продуктылар
-
COVID-19 IgM/IgG антителолорду аныктоо комплекти
COVID-19 IgM/IgG антителолорду аныктоо комплекти （Коллоиддик алтын иммунохроматография методу) Продукт боюнча колдонмо 【ПРОДУКЦИЯНЫН АТЫ】COVID- 19 IgM/IgG антителолорду аныктоо комплекти （Коллоиддик алтын иммунохроматография ыкмасы) 【PACIFKAGs/SPECKAG1Ks бул 【 АБСТРАКТ】 Жаңы коронавирустар β түрүнө кирет. COVID-19 курч респиратордук инфекциялык оору. Адамдар жалпысынан сезгич болушат. Учурда коронавирустун жаңы түрүн жуктурган бейтаптар негизги булак...
-
Нуклеин кислотасын экстракциялоо же тазалоочу комплект
Нуклеин кислотасын экстракциялоо же тазалоо комплекти же -20℃ сакталат. Үлгү 0 ℃ керлингди колдонуу менен ташылышы керек. Киришүү Нуклеин кислотасын экстракциялоо же тазалоо комплекти (магниттик мончоктор ыкмасы) автоматташтырылган нуклеин кислотасын экстракциялоочу аспаптарды колдонуу менен РНКны жана ДНКны дене суюктуктарынан (мисалы, тампондор, плазма, сывороткалар) автоматташтырылган тазалоо үчүн иштелип чыккан. Магниттик бөлүкчөлөр технологиясы жогорку сапаттагы ДНК/РНКны камсыз кылат, ал ...
-
SARS-CoV-2 антигенди анализдөө комплекти (иммунохроматогр...
SARS-CoV-2 антигенди анализдөө комплекти (Иммунохроматография ыкмасы) Продукт колдонмосу 【ПРОДУКЦИЯНЫН АТЫ】SARS-CoV-2 Антигенди анализдөө комплекти (Иммунохроматография ыкмасы) 【ПАКТАМА СИПАТТАМАСЫ】 1 Test/Kit coronavirus 】ABSTR генге таандык. COVID-19 курч респиратордук инфекциялык оору. Адамдар жалпысынан сезгич болушат. Учурда коронавирустун жаңы түрүн жуктурган бейтаптар негизги...
-
SARS-CoV-2 антигенди анализдөө комплекти
SARS-CoV-2 антигенди анализдөө комплекти (Иммунохроматография ыкмасы) Продукт колдонмосу 【ПРОДУКЦИЯНЫН АТЫ】SARS-CoV-2 Антигенди анализдөө комплекти (Иммунохроматография ыкмасы) 【ПАКТАМА СПЕКТАФИКАЦИЯЛАРЫ】 1 Test/Kits/ACTRABITs, 25TABITs, 】 The жаңы коронавирустар β тукумуна кирет. COVID-19 курч респиратордук инфекциялык оору. Адамдар жалпысынан сезгич болушат. Учурда коронавирустун жаңы түрү менен ооруган бейтаптар инфекциянын негизги булагы болуп саналат; асимптоматикалык инфекция жуккан адамдар...